Pochopení ligace v molekulární biologii: Spojení fragmentů DNA pro klonování, genetické inženýrství, diagnostiku a forenzní analýzu
Ligace je proces v molekulární biologii, kde jsou dva nebo více fragmentů DNA spojeny vytvořením kovalentní vazby mezi nimi. To se obvykle provádí pomocí enzymu zvaného ligáza, který katalyzuje tvorbu fosfodiesterové vazby mezi 5' koncem jednoho fragmentu DNA a 3' koncem jiného fragmentu DNA. Výsledná ligovaná molekula DNA má jeden řetězec se dvěma nebo více samostatnými sekvencemi DNA spojených dohromady. Klonování: Ligace se často používá ke spojení více fragmentů DNA dohromady k vytvoření větší molekuly DNA, která může být zavedena do hostitelského organismu pro expresi.
2. Genetické inženýrství: Ligaci lze použít k zavedení specifických genetických změn do genomu organismu spojením fragmentů DNA obsahujících požadované změny.
3. Diagnostika: Ligaci lze použít k detekci specifických sekvencí DNA ve vzorku připojením sondy nebo primeru k cílové sekvenci DNA a pak detekcí přítomnosti ligovaného produktu.
4. Forenzní analýza: Ligaci lze použít ke spojení více vzorků DNA z různých zdrojů, což umožňuje srovnání genetického materiálu mezi vzorky. a specifičnost.