Κατανόηση του Ισοηλεκτρικού Σημείου (pI) στον Καθαρισμό και την Ανάλυση Πρωτεϊνών

Το ισοηλεκτρικό σημείο (pI) είναι το pH στο οποίο μια πρωτεΐνη ή άλλο μόριο δεν έχει καθαρό φορτίο, που σημαίνει ότι ο αριθμός των θετικά φορτισμένων υπολειμμάτων αμινοξέων είναι ίσος με τον αριθμό των αρνητικά φορτισμένων υπολειμμάτων. Σε αυτό το σημείο, το μόριο είναι ηλεκτρικά ουδέτερο και δεν έχει συνολικό φορτίο.

Για παράδειγμα, εάν μια πρωτεΐνη έχει pI 5,0, σημαίνει ότι η πρωτεΐνη έχει ίσο αριθμό θετικά φορτισμένων (όξινων) και αρνητικά φορτισμένων (βασικών) υπολείμματα αμινοξέων σε ρΗ 5,0. Εάν το pH είναι υψηλότερο ή χαμηλότερο από το pI, η πρωτεΐνη θα έχει καθαρό φορτίο λόγω της άνισης κατανομής των φορτίων.

Το ισοηλεκτρικό σημείο είναι σημαντικό στον καθαρισμό και την ανάλυση των πρωτεϊνών επειδή μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον διαχωρισμό πρωτεϊνών με βάση το φορτίο τους. Για παράδειγμα, οι πρωτεΐνες με υψηλό pI είναι συνήθως πιο βασικές και τείνουν να είναι θετικά φορτισμένες σε χαμηλότερες τιμές pH, ενώ οι πρωτεΐνες με χαμηλό pI είναι συνήθως πιο όξινες και τείνουν να φορτίζονται αρνητικά σε υψηλότερες τιμές pH. Αυτό μπορεί να είναι χρήσιμο για τον διαχωρισμό πρωτεϊνών από διαφορετικές πηγές ή για την αναγνώριση συγκεκριμένων ζωνών πρωτεΐνης σε στύπωμα Western.