Elisa アッセイを理解する: 原理、手順、および応用

Elisa (酵素結合免疫吸着アッセイ) は、サンプル中のタンパク質またはペプチドを検出および定量するために分子生物学で広く使用されている技術です。これには、標的タンパク質またはペプチドを抗体に結合させることが含まれ、その後、酵素ベースの基質を使用して検出されます。このアッセイは競合結合の原理に基づいており、標的タンパク質またはペプチドが抗体への結合に関して既知の標準と競合します。Elisa アッセイの基本手順は次のとおりです。サンプルの調製: サンプルは、組織または細胞から目的のタンパク質またはペプチドを抽出することによって調製されます。標準の調製: 既知量の標的タンパク質またはペプチドが標準として調製されます。3. プレートのコーティング: マイクロタイタープレートは、標的タンパク質またはペプチドに結合する特異的な抗体でコーティングされています。インキュベーションと洗浄: サンプルと標準をプレートに加え、一定期間インキュベートします。次に、プレートを洗浄して未結合の物質を除去します。5. 検出: 酵素結合抗体などの基質をプレートに添加し、さらに一定時間インキュベートします。基質は結合した標的タンパク質またはペプチドに結合し、色の変化を引き起こします。6. 測定: 色の強度は、分光光度計またはその他の適切な装置を使用して測定されます。計算: 各サンプル中の標的タンパク質またはペプチドの量は、色の強度と標準の既知の濃度に基づいて計算されます。Elisa アッセイは、免疫学、がん研究、感染症診断、医薬品などの多くの分野で広く使用されています。発達。これらは、ウェスタンブロッティングやラジオイムノアッセイなどの他の技術に比べて、より高い感度、特異性、簡単さなど、いくつかの利点を提供します。