Memahami Ligasi dalam Biologi Molekul: Menyertai Serpihan DNA untuk Pengklonan, Kejuruteraan Genetik, Diagnostik dan Analisis Forensik
Ligasi adalah proses dalam biologi molekul di mana dua atau lebih serpihan DNA dicantumkan dengan membentuk ikatan kovalen di antara mereka. Ini biasanya dilakukan menggunakan enzim yang dipanggil ligase, yang memangkinkan pembentukan ikatan fosfodiester antara hujung 5' satu serpihan DNA dan hujung 3' serpihan DNA yang lain. Molekul DNA berikat yang terhasil mempunyai helai tunggal dengan dua atau lebih jujukan DNA berasingan yang dicantumkan.
Pengikatan ialah teknik biasa yang digunakan dalam banyak aplikasi berbeza dalam biologi molekul, termasuk:
1. Pengklonan: Ligasi selalunya digunakan untuk menggabungkan beberapa serpihan DNA bersama-sama untuk mencipta molekul DNA yang lebih besar yang boleh dimasukkan ke dalam organisma perumah untuk diekspresikan.
2. Kejuruteraan genetik: Ligasi boleh digunakan untuk memperkenalkan perubahan genetik tertentu ke dalam genom organisma dengan menggabungkan serpihan DNA yang mengandungi perubahan yang dikehendaki.
3. Diagnostik: Ligasi boleh digunakan untuk mengesan jujukan DNA tertentu dalam sampel dengan mencantumkan probe atau primer kepada jujukan DNA sasaran dan kemudian mengesan kehadiran produk yang diikat.
4. Analisis forensik: Ligasi boleh digunakan untuk menggabungkan berbilang sampel DNA daripada sumber yang berbeza, membolehkan perbandingan bahan genetik antara sampel.
Secara keseluruhannya, ligasi ialah alat yang berkuasa dalam biologi molekul yang membolehkan penyelidik memanipulasi dan menganalisis molekul DNA dengan ketepatan tinggi dan kekhususan.