Inzicht in het iso-elektrisch punt (pI) bij eiwitzuivering en -analyse

Iso-elektrisch punt (pI) is de pH waarbij een eiwit of ander molecuul geen netto lading heeft, wat betekent dat het aantal positief geladen aminozuurresiduen gelijk is aan het aantal negatief geladen residuen. Op dit punt is het molecuul elektrisch neutraal en heeft het geen algehele lading. Als een eiwit bijvoorbeeld een pI van 5,0 heeft, betekent dit dat het eiwit een gelijk aantal positief geladen (zuur) en negatief geladen (basische) ladingen heeft. aminozuurresiduen bij een pH van 5,0. Als de pH hoger of lager is dan de pI, zal het eiwit een netto lading hebben vanwege de ongelijke verdeling van de ladingen. Het iso-elektrische punt is belangrijk bij de zuivering en analyse van eiwitten omdat het kan worden gebruikt om eiwitten te scheiden op basis van hun lading. Eiwitten met een hoge pI zijn bijvoorbeeld doorgaans basischer en hebben de neiging positief geladen te zijn bij lagere pH-waarden, terwijl eiwitten met een lage pI doorgaans zuurder zijn en de neiging hebben negatief geladen te zijn bij hogere pH-waarden. Dit kan nuttig zijn voor het scheiden van eiwitten uit verschillende bronnen of voor het identificeren van specifieke eiwitbanden op een Western blot.