Zrozumienie punktu izoelektrycznego (pI) w oczyszczaniu i analizie białek

Punkt izoelektryczny (pI) to pH, przy którym białko lub inna cząsteczka nie ma ładunku netto, co oznacza, że liczba dodatnio naładowanych reszt aminokwasowych jest równa liczbie reszt naładowanych ujemnie. W tym momencie cząsteczka jest elektrycznie obojętna i nie ma całkowitego ładunku.

Na przykład, jeśli białko ma pI równe 5,0, oznacza to, że białko ma taką samą liczbę dodatnio naładowanych (kwasowych) i ujemnie naładowanych (zasadowych) reszty aminokwasowe przy pH 5,0. Jeśli pH jest wyższe lub niższe niż pI, białko będzie miało ładunek netto ze względu na nierówny rozkład ładunków.…
Punkt izoelektryczny jest ważny w oczyszczaniu i analizie białek, ponieważ można go wykorzystać do rozdzielenia białek na podstawie ich ładunku. Na przykład białka o wysokim pI są zazwyczaj bardziej zasadowe i zwykle mają ładunek dodatni przy niższych wartościach pH, podczas gdy białka o niskim pI są zazwyczaj bardziej kwaśne i mają tendencję do posiadania ładunku ujemnego przy wyższych wartościach pH. Może to być przydatne do oddzielania białek z różnych źródeł lub do identyfikacji określonych prążków białkowych metodą Western blot.