Compreendendo o ponto isoelétrico (pI) na purificação e análise de proteínas
O ponto isoelétrico (pI) é o pH no qual uma proteína ou outra molécula não tem carga líquida, o que significa que o número de resíduos de aminoácidos carregados positivamente é igual ao número de resíduos carregados negativamente. Neste ponto, a molécula é eletricamente neutra e não tem carga geral.
Por exemplo, se uma proteína tem um pI de 5,0, significa que a proteína tem um número igual de cargas positivas (ácidas) e carregadas negativamente (básicas) resíduos de aminoácidos a um pH de 5,0. Se o pH for superior ou inferior ao pI, a proteína terá uma carga líquida devido à distribuição desigual de cargas.
O ponto isoelétrico é importante na purificação e análise de proteínas porque pode ser usado para separar proteínas com base em sua carga. Por exemplo, proteínas com um pI alto são tipicamente mais básicas e tendem a ter carga positiva em valores de pH mais baixos, enquanto proteínas com um pI baixo são tipicamente mais ácidas e tendem a ter carga negativa em valores de pH mais elevados. Isto pode ser útil para separar proteínas de diferentes fontes ou para identificar bandas proteicas específicas em um Western blot.
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