Înțelegerea punctului izoelectric (pI) în purificarea și analiza proteinelor

Punctul izoelectric (pI) este pH-ul la care o proteină sau o altă moleculă nu are sarcină netă, ceea ce înseamnă că numărul de resturi de aminoacizi încărcate pozitiv este egal cu numărul de reziduuri încărcate negativ. În acest moment, molecula este neutră din punct de vedere electric și nu are o sarcină totală.

De exemplu, dacă o proteină are un pI de 5,0, înseamnă că proteina are un număr egal de încărcate pozitiv (acide) și negative (de bază) reziduuri de aminoacizi la un pH de 5,0. Dacă pH-ul este mai mare sau mai mic decât pI, proteina va avea o sarcină netă din cauza distribuției inegale a sarcinilor.

Punctul izoelectric este important în purificarea și analiza proteinelor, deoarece poate fi folosit pentru a separa proteinele în funcție de sarcina lor. De exemplu, proteinele cu un pI ridicat sunt de obicei mai bazice și tind să fie încărcate pozitiv la valori mai mici ale pH-ului, în timp ce proteinele cu un pI scăzut sunt de obicei mai acide și tind să fie încărcate negativ la valori mai mari ale pH-ului. Acest lucru poate fi util pentru separarea proteinelor din diferite surse sau pentru identificarea benzilor de proteine specifice pe un Western blot.