Förstå isoelektrisk punkt (pI) i proteinrening och analys

Isoelektrisk punkt (pI) är det pH vid vilket ett protein eller annan molekyl inte har någon nettoladdning, vilket betyder att antalet positivt laddade aminosyrarester är lika med antalet negativt laddade rester. Vid denna tidpunkt är molekylen elektriskt neutral och har inte en övergripande laddning.

Till exempel, om ett protein har ett pI på 5,0 betyder det att proteinet har lika många positivt laddade (sura) och negativt laddade (basic) aminosyrarester vid ett pH av 5,0. Om pH är högre eller lägre än pI kommer proteinet att ha en nettoladdning på grund av den ojämna fördelningen av laddningar.

Den isoelektriska punkten är viktig vid proteinrening och analys eftersom den kan användas för att separera proteiner baserat på deras laddning. Till exempel är proteiner med ett högt pI typiskt mer basiska och tenderar att vara positivt laddade vid lägre pH-värden, medan proteiner med ett lågt pI vanligtvis är surare och tenderar att vara negativt laddade vid högre pH-värden. Detta kan vara användbart för att separera proteiner från olika källor eller för att identifiera specifika proteinband på en Western blöt.