Protein Saflaştırma ve Analizinde İzoelektrik Noktayı (pI) Anlamak

İzoelektrik nokta (pI), bir proteinin veya başka bir molekülün net yükünün bulunmadığı pH değeridir; bu, pozitif yüklü amino asit kalıntılarının sayısının, negatif yüklü kalıntıların sayısına eşit olduğu anlamına gelir. Bu noktada molekül elektriksel olarak nötrdür ve genel bir yüke sahip değildir.

Örneğin, bir proteinin pI değeri 5,0 ise bu, proteinin eşit sayıda pozitif yüklü (asidik) ve negatif yüklü (bazik) olduğu anlamına gelir. pH 5.0'da amino asit kalıntıları. PH, pI'dan daha yüksek veya daha düşükse, yüklerin eşit olmayan dağılımı nedeniyle protein net bir yüke sahip olacaktır.

İzoelektrik nokta, protein saflaştırmasında ve analizinde önemlidir çünkü proteinleri yüklerine göre ayırmak için kullanılabilir. Örneğin, yüksek pl'ye sahip proteinler tipik olarak daha baziktir ve daha düşük pH değerlerinde pozitif yüklü olma eğilimindeyken, düşük pI'lı proteinler tipik olarak daha asidiktir ve daha yüksek pH değerlerinde negatif yüklü olma eğilimindedir. Bu, proteinleri farklı kaynaklardan ayırmak veya Western blot üzerinde spesifik protein bantlarını tanımlamak için yararlı olabilir.