


了解 Elisa 检测:原理、步骤和应用
Elisa(酶联免疫吸附测定)是分子生物学中广泛使用的一种技术,用于检测和定量样品中的蛋白质或肽。它涉及将目标蛋白或肽与抗体结合,然后使用基于酶的底物进行检测。该测定基于竞争性结合的原理,其中靶蛋白或肽与已知的标准品竞争与抗体的结合。 Elisa 测定的基本步骤如下: 1.样品的制备:通过从组织或细胞中提取感兴趣的蛋白质或肽来制备样品。标准品的制备:制备已知量的目标蛋白或肽作为标准品。
3.板的涂层:微量滴定板涂有与目标蛋白或肽结合的特异性抗体。
4。孵育和洗涤:将样品和标准品添加到板中并孵育一段时间。然后洗涤板以除去任何未结合的材料。
5。检测:将底物(例如酶缀合抗体)添加到板中并再孵育一段时间。底物与结合的目标蛋白或肽结合,导致颜色变化。
6。测量:使用分光光度计或其他合适的设备测量颜色的强度。
7。计算:根据颜色的强度和标准品的已知浓度计算每个样品中目标蛋白或肽的含量。Elisa 检测广泛应用于许多领域,包括免疫学、癌症研究、传染病诊断和药物发展。与蛋白质印迹和放射免疫分析等其他技术相比,它们具有多种优势,包括更高的灵敏度、特异性和简单性。



