Isoelektrisen pisteen (pI) ymmärtäminen proteiinien puhdistuksessa ja analyysissä

Isoelektrinen piste (pI) on pH, jossa proteiinilla tai muulla molekyylillä ei ole nettovarausta, mikä tarkoittaa, että positiivisesti varautuneiden aminohappotähteiden lukumäärä on yhtä suuri kuin negatiivisesti varautuneiden tähteiden lukumäärä. Tässä vaiheessa molekyyli on sähköisesti neutraali eikä sillä ole kokonaisvarausta.

Esimerkiksi jos proteiinin pI on 5,0, se tarkoittaa, että proteiinissa on yhtä monta positiivisesti varautunutta (hapan) ja negatiivisesti varautunutta (emäksistä) aminohappotähteet pH:ssa 5,0. Jos pH on korkeampi tai pienempi kuin pI, proteiinilla on nettovaraus varausten epätasaisen jakautumisen vuoksi.

Isoelektrinen piste on tärkeä proteiinin puhdistuksessa ja analysoinnissa, koska sen avulla voidaan erottaa proteiineja varauksen perusteella. Esimerkiksi proteiinit, joilla on korkea pI, ovat tyypillisesti emäksisempiä ja taipumus olla positiivisesti varautuneita alhaisemmissa pH-arvoissa, kun taas proteiinit, joilla on alhainen pI, ovat tyypillisesti happamampia ja taipumus olla negatiivisesti varautuneita korkeammissa pH-arvoissa. Tämä voi olla hyödyllistä proteiinien erottamisessa eri lähteistä tai spesifisten proteiinijuovien tunnistamiseksi Western blot -testillä.