Tieteellisen tutkimuksen määritysten ymmärtäminen

Määrityksellä tarkoitetaan prosessia, jossa mitataan aineen, tyypillisesti lääkkeen tai biologisen näytteen, pitoisuutta tai tehoa. Termi "määritys" tulee vanhasta ranskalaisesta sanasta "essai", joka tarkoittaa "testiä" tai "koetta". Tieteellisessä tutkimuksessa määrityksiä käytetään määrittämään tietyn aineen määrä näytteessä ja määrittämään sen tehokkuus tai voimakkuus. On olemassa monia erilaisia määrityksiä, joista jokainen on suunniteltu mittaamaan aineen tiettyä ominaisuutta tai ominaisuutta. Joitakin yleisiä esimerkkejä ovat:
1. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA): Tämä on laajalti käytetty tekniikka proteiinien tai muiden molekyylien pitoisuuden havaitsemiseksi ja mittaamiseksi näytteessä. Se sisältää kohdemolekyylin sitomisen vasta-aineeseen, joka sitten havaitaan käyttämällä entsyymiä, joka katalysoi kolorimetristä tai fluoresoivaa reaktiota.
2. Polymeraasiketjureaktio (PCR): Tämä on menetelmä spesifisten DNA-sekvenssien monistamiseksi näytteessä. Se sisältää DNA:n kaksoisjuosteiden denaturoinnin ja uusien DNA-säikeiden synteesin käynnistämisen komplementaarisilla alukkeilla. Tuloksena oleva PCR-tuote voidaan kvantifioida käyttämällä erilaisia menetelmiä, kuten reaaliaikaista PCR- tai agaroosigeelielektroforeesia.
3. Korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC): Tämä on tehokas tekniikka monimutkaisen seoksen komponenttien erottamiseen ja tunnistamiseen. Se sisältää näytteen pumppaamisen stationaarifaasilla täytetyn kolonnin läpi, minkä jälkeen eluoituneet yhdisteet havaitaan useilla eri menetelmillä, kuten UV-Vis-spektroskopialla tai massaspektrometrialla.
4. Radioimmunomääritys (RIA): Tämä on määritys, joka käyttää radioaktiivisia isotooppeja tietyn molekyylin pitoisuuden mittaamiseen näytteessä. Se sisältää kohdemolekyylin leimaamisen radioaktiivisella merkkiaineella ja sen jälkeen tuloksena olevan säteilyn havaitsemisen gammalaskimella tai muulla säteilyn havaitsemislaitteella.
5. Entsyymi-immunosorbenttipistemääritys (ELISPOT): Tämä on ELISA-tekniikan muunnelma, jossa käytetään kiinteää faasia, kuten mikrolevyä, vasta-aineiden tai muiden molekyylien pitoisuuden mittaamiseen näytteessä. Siihen kuuluu näytteen lisääminen spesifisellä antigeenillä ja sitten antigeenin sitoutumisen havaitseminen vasta-aineisiin käyttämällä entsyymikonjugoitua sekundaarista vasta-ainetta. Nämä ovat vain muutamia esimerkkejä monista erityyppisistä määrityksistä, joita käytetään tieteellisessä tutkimuksessa. Jokaisella määrityksellä on omat vahvuutensa ja rajoituksensa, ja määrityksen valinta riippuu tietystä tutkimuskysymyksestä ja kokeen suunnittelusta.