ทำความเข้าใจจุดไอโซอิเล็กทริก (pI) ในการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์และการวิเคราะห์

จุดไอโซอิเล็กทริก (pI) คือค่า pH ที่โปรตีนหรือโมเลกุลอื่นๆ ไม่มีประจุสุทธิ ซึ่งหมายความว่าจำนวนกรดอะมิโนที่มีประจุบวกจะเท่ากับจำนวนประจุตกค้างที่มีประจุลบ ณ จุดนี้ โมเลกุลมีความเป็นกลางทางไฟฟ้าและไม่มีประจุโดยรวม

ตัวอย่างเช่น หากโปรตีนมี pI เท่ากับ 5.0 หมายความว่าโปรตีนนั้นมีประจุบวก (กรด) และประจุลบ (เบส) ในจำนวนเท่ากัน กรดอะมิโนตกค้างที่ pH 5.0 หากค่า pH สูงหรือต่ำกว่า pI โปรตีนจะมีประจุสุทธิเนื่องจากการกระจายตัวของประจุไม่เท่ากัน จุดไอโซอิเล็กทริกมีความสำคัญในการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์และการวิเคราะห์ เนื่องจากสามารถใช้แยกโปรตีนตามประจุของพวกมันได้ ตัวอย่างเช่น โปรตีนที่มีค่า pI สูงมักมีความเป็นกรดมากกว่าและมีแนวโน้มที่จะมีประจุบวกที่ค่า pH ต่ำกว่า ในขณะที่โปรตีนที่มีค่า pI ต่ำมักมีความเป็นกรดมากกว่าและมีแนวโน้มที่จะมีประจุลบที่ค่า pH สูงกว่า สิ่งนี้มีประโยชน์สำหรับการแยกโปรตีนออกจากแหล่งต่างๆ หรือเพื่อระบุแถบโปรตีนที่จำเพาะบนเวสเทิร์นบล็อต